¿Qué es la baciloscopia?

La tuberculosis es una de las enfermedades más antiguas que se conocen y, por fortuna, hoy existen múltiples métodos diagnósticos. A continuación te hablaremos de la baciloscopia.

Revisado y aprobado por la médico Sandra Golfetto Miskiewicz.

Escrito por Sandra Golfetto Miskiewicz

Última actualización: 26 octubre, 2021

La baciloscopia o BK es un procedimiento de laboratorio en el cual, mediante la observación directa utilizando un microscopio óptico, se detecta la presencia de bacilos (bacterias de forma cilíndrica, como una salchicha), en una muestra de esputo, en fluidos o en tejidos del organismo.

Uno de los mencionados es el bacilo de Koch o también llamado Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) que transmite la tuberculosis (TB).

Generalidades sobre la tuberculosis

Para entender un poco mejor los fundamentos y la efectividad de la baciloscopia, conviene dedicar algunas líneas a la enfermedad que se pretende diagnosticar: la tuberculosis.

Transmisión

La tuberculosis es una enfermedad infecciosa, transmitida casi exclusivamente por vía aérea. Los bacilos se encuentran en las pequeñas gotas de saliva que son expulsadas al toser la persona infectada con TB pulmonar.

El riesgo de contraer la enfermedad se incrementa al aumentar el número de casos en una comunidad o convivir por largo tiempo con el enfermo, principalmente en ambientes poco ventilados.

Aunque la TB puede manifestarse en cualquier órgano que no sean los pulmones (TB extrapulmonar), la forma más frecuente e infectante es la enfermedad pulmonar.

Debido a que el bacilo es oxígeno-dependiente, los pacientes con TB pulmonar pueden desarrollar cavidades en los ápices pulmonares. Aquí hay mayor concentración de oxígeno y, por lo tanto, es el lugar donde se aloja una gran cantidad de estos bacilos. Al toser, estos son expulsados a través de las vías aéreas superiores en forma de esputo.

Los pacientes más infectantes son los que tienen baciloscopia positiva, en especial si su enfermedad es severa y con cavitación.

Síntomas

El síntoma más característico de la TB pulmonar es tos con expectoración de dos o más semanas de duración. A estos pacientes se les denomina sintomáticos respiratorios (SR). También pueden presentar pérdida de peso, sudoración nocturna y dolor torácico.

La mayoría de las personas que inhalan los bacilos de la TB se infectan, pero el sistema inmunitario logra impedir su multiplicación e inactivarlos. En estos casos se habla de tuberculosis latente (en inglés, LTBI).

Estas personas tienen una pequeña cantidad bacilos de TB vivos, pero están inactivos, no tienen síntomas, no se sienten enfermas, tienen radiografía de tórax normal, no pueden transmitir la enfermedad y generalmente tienen la prueba de la tuberculina (PPD) positiva. En ciertas situaciones, puede llegar a reactivarse la TB si no reciben tratamiento para LTBI.

Diagnóstico

El diagnóstico de certeza de TB puede hacerse mediante los siguientes métodos:

• Baciloscopia: es un procedimiento simple, económico, eficiente y rápido para detectar los casos sospechosos de TB y hacer seguimiento de los mismos después del tratamiento. Continúa siendo la primera prueba diagnóstica en muchos países en los cuales se dificulta el uso de pruebas rápidas moleculares.
• Cultivo en medio líquido: el cultivo es el método de diagnóstico bacteriológico de mayor sensibilidad, siendo el estándar de oro para la detección de TB y el único método válido para seguir la evolución de los pacientes y confirmar su curación. Su principal desventaja es el tiempo de espera para obtener los resultados.
  • Es el mejor método diagnóstico para TB extrapulmonares.
  • Hasta ahora se han usado los medios de cultivo de Lowenstein-Jensen y de Ogawa-Kudoh por ser sencillos y menos costosos. Utilizando esta última técnica, se logra aumentar el número de nuevos pacientes diagnosticados (hasta un 30 % más) de muestras positivas que con baciloscopia.
  • El cultivo permite lo siguiente:
    • Confirmar la presencia de bacilos viables en el caso de pacientes con baciloscopia positiva.
    • Identificar al paciente paucibacilar (paciente con escasa cantidad de bacilos, como los niños), por lo cual es imprescindible su cultivo en estos casos.
    • Descartar resistencia al tratamiento y la sospecha de micobacterias no tuberculosas.
• Prueba molecular rápida (ensayo Xpert MTB/RIF, Xpert MTB/ultra RIF o el TB-LAMP): han sido recomendadas para la identificación rápida en muestras de líquido cefalorraquídeo y biopsias por ser pruebas más sensibles. Detectan ADN de bacilos vivos, pero también los no viables.

La baciloscopia: uno de los métodos diagnósticos más usados

Al tratarse de una técnica económica, fácil de realizar y efectiva, la baciloscopia es una de las más populares en ciertos países, formando parte de los planes estratégicos en materia de salud pública para controlar la enfermedad.

Utilidad

• La baciloscopia permite el diagnóstico de TB activa y conocer la eficacia del tratamiento de TB en los pacientes.
• Permite identificar la tuberculosis pero no es específica para esta, ya que también permite reconocer otros bacilos ácido-alcohol resistentes (BAAR) que pertenecen al género Mycobacterium.

¿Qué muestras se pueden usar para realizar la baciloscopia?

Como se dijo anteriormente, la muestra más frecuente es la de secreción pulmonar (esputo), pero como puede afectar cualquier órgano del cuerpo, el médico puede tomar muestras de líquido pleural, líquido cefalorraquídeo, líquido ascítico, sangre, orina, secreción purulenta de algún absceso, biopsias, etc.

Todas las muestras de órganos extrapulmonares deben ser procesadas para cultivo y, en lo posible, para pruebas rápidas moleculares.

¿Cómo se toman las muestras para la baciloscopia?

Para recoger la muestra de esputo, no sirve solamente escupir saliva en un recipiente estéril, generalmente ofrecido por el laboratorio.

• La persona debe realizar una inspiración profunda y luego toser con fuerza varias veces, de manera que logre expulsar o expectorar la secreción que proviene de los pulmones y de los bronquios. El mismo procedimiento se debe realizar otras 2 veces.
• En caso de niños o de pacientes psiquiátricos, el personal especializado puede inducir la excreción de esputo mediante procedimientos que facilitan el drenaje o la aspiración de secreciones.

Se reconoce una expectoración adecuada para el análisis aquella que sea espesa y blanquecina o amarillo-verdosa, a veces sanguinolenta.

El envase a usar debe ser de boca ancha, de 40-50 mililitros de capacidad, cierre hermético tipo rosca, de material plástico transparente y resistente a rupturas. No debe ser reutilizado para evitar contaminación.

Baciloscopia para diagnóstico

Se recomienda tomar dos muestras de esputo. La primera muestra detecta aproximadamente el 80 % de los casos positivos (debe ser tomada durante la primera consulta médica), la segunda 15 %  (debe ser tomada por el paciente al despertar en la mañana) y la tercera, 5 %. Las muestras también se pueden tomar mediante el lavado bronquial o durante una fibrobroncoscopia.

Baciloscopia para control de efectividad del tratamiento

El tratamiento estándar de la TB comprende dos fases:

• Fase intensiva: dura un promedio de 2 meses
• Fase de consolidación: dura un promedio de 6 meses

Utilizando la baciloscopia, los controles se harían a los 2, 5 y 6 meses durante el tratamiento. Debe haber disminución progresiva de la positividad, hasta negativización de la baciloscopia. En caso de positividad persistente, se realizarán cultivos con prueba de sensibilidad para conocer si hay resistencia al tratamiento o lo observado al microscopio son bacilos vivos o muertos.

Conservación de la muestra

Si la muestra de esputo va a ser recogida para baciloscopia, debe ser conservada en el refrigerador, envuelta y bien amarrada en una bolsa de plástico o por lo menos en un lugar fresco y protegida de la luz. Debe ser llevada lo más pronto al laboratorio.

Técnica utilizada para realizar la baciloscopia

1. Se seleccionan las partículas más purulentas de la muestra para aumentar la probabilidad de conseguir los bacilos, y luego se extienden con el aplicador en el centro del portaobjeto, con un grosor homogéneo.
2. Dejar secar.
3. Después, se pasa por la llama 3-4 veces sin sobrecalentar.
4. Por último, se realiza la tinción de Ziehl-Nielsen (auramina-rodamina o tinción de resistencia): primero se aplica fucsina fenicada o auramina, se aplica calor y luego se agrega una mezcla de ácido y alcohol, quienes actúan como decolorantes. Utilizando como colorante de contraste el azul de metileno.

Base de la técnica

La técnica se basa en la llamada ácido-alcohol resistencia. Las micobacterias contienen un elevado contenido de lípidos, entre ellos los ácidos micólicos en la pared celular, quienes les permiten fijar en su pared celular a la fucsina fenicada o auramina y continuar reteniéndola, incluso posterior a la aplicación de una mezcla de ácido y alcohol.

Al teñir la muestra con fucsina básica, las bacterias toman una coloración rojiza y luego, al agregar el alcohol ácido, los lípidos de las bacterias resisten la decoloración. Por eso se llaman bacilos ácido-alcohol resistentes (BAAR).

Al observar el portaobjetos al microscopio, se observan pequeños bastones color rojo fucsia sobre un fondo azulado. Dependiendo de la coloración utilizada, si se realizan extendidos con tinción con auramina-O, se observarán dichos bastones fluorescentes amarillo-verdosos sobre un fondo oscuro.

Contaje de BAAR

Se recorre sistemáticamente el extendido, observando cada campo del microscopio en superficie y en profundidad con lentes 10x y 100x (con aceite de inmersión) y se anota cuántos BAAR se observan en cada campo. Entonces, se obtiene un promedio de bacilos presentes. Cuantos menos BAAR se encuentren, más número de campos útiles se deben examinar.

Toma aproximadamente 5 minutos la lectura de 100 campos.

¿Cómo se reporta la baciloscopia?

A nivel internacional, se ha adoptado el siguiente informe utilizando la técnica de Ziehl-Neelsen:

1. No se observa BAAR en 100 campos microscópicos se reporta como “no se observan bacilos ácido-alcohol resistentes”.
2. 1 a 9 BAAR en 100 campos: se coloca número de total de BAAR hallados en 100 campos.
3. 10 a 99 BAAR en 100 campos: se coloca: positivo (+).
4. 1 a 10 BAAR en 50 campos: se coloca: positivo (++).
5. Más de 10 BAAR en 20 campos: se coloca: positivo (+++).

Entonces, si la baciloscopia es positiva (+, ++, +++) significa que el paciente tiene TB.

Si la baciloscopia reporta menos de 5 BAAR en 100 campos, se recomienda ampliar la lectura a 200 campos, realizar una prueba de PCR y cultivo en medio líquido.

También se ha establecido a nivel internacional la lectura e informe de resultados de láminas teñidas por fluorescencia.

En lo posible, los resultados deben ser entregados nuevamente al centro de salud, dentro de las 24 horas de haber recibido el material por el laboratorio.

Calidad de las baciloscopias

Para asegurar la calidad de las baciloscopias, cada laboratorio debe hacer lo siguiente:

• Seguir las reglas estipuladas para el uso apropiado del material, y así evitar contaminación.
• Tener un manejo adecuado de los residuos y desechos del laboratorio.
• Evaluación de calidad interna (monitoreo de indicadores de desempeño).
• Evaluación de calidad externa (pruebas de eficiencia).

¿Cómo lograr que la baciloscopia sea una buena herramienta de control?

• Esto se logra mediante una adecuada calidad técnica y mantener una adecuada calidad de los registros e informes de laboratorio.
• Todos los servicios de laboratorio deben integrarse a una Red Nacional de Laboratorios de Tuberculosis e involucrar a los laboratorios públicos y privados de manera de complementarse entre los servicios.
• Se debe lograr estandarizar los procedimientos (periódicamente revisada por la Organización Panamericana de la Salud (OPS), Organización Mundial de la Salud (OMS) y la Unión Internacional Contra la Tuberculosis y Enfermedades Respiratorias (LA UNION).

Sensibilidad y especificidad de la baciloscopia

La baciloscopia tiene una sensibilidad baja (40-60%) y una especificidad muy elevada. La baciloscopia presenta una sensibilidad aún más baja en casos de enfermedad extrapulmonar, niños y pacientes con VIH/SIDA.

Baciloscopia, presente y futuro

La coloración de Ziehl-Nielsen (baciloscopia) ha sido la técnica más empleada durante los últimos 100 años, ya que requiere un entrenamiento más sencillo.

En los países endémicos de TB, una baciloscopia positiva de una muestra respiratoria en un paciente inmunocompetente tiene alto valor predictivo. Es decir, es muy bajo el riesgo de equivocarse al diagnosticar la enfermedad.

Los trabajadores de laboratorio que procesan las muestras siempre deben observar las medidas de bioseguridad recomendadas y sistematizar las actividades para así reducir el riesgo de contagio.

El riesgo de contraer tuberculosis se incrementa con el aumento de número de casos en una comunidad, por lo que es esencial el diagnóstico precoz, siendo la baciloscopia (BK) una herramienta fundamental.

Nuevas técnicas que están surgiendo son la microscopía de fluorescencia con lámpara de mercurio y, desde hace 10 años, la OMS ha recomendado el uso de la microscopía de fluorescencia la lámpara con LED.

Esta última es más sensible, no se necesita una habitación totalmente oscura para la lectura de los extendidos, el tiempo de lectura se reduce casi a la mitad y hay menor riesgo de contaminación. Sin embargo, el personal necesita el adiestramiento adecuado.